providencia stuartii что это такое
PROVIDENCIA
Providencia — род грамотрицательных бактерий, относящихся к трибе Proteae семейства Enterobacteriaceae.
В роде Providencia различают два биохимических вида: Providencia alcalifaciens и Providencia stuartii. В определителе бактерий Берджи (1974) род Providencia представлен как вид Proteus inconstans, разделенный на две подгруппы — А и В. Providencia — грамотрицательные, не образующие спор и капсул, подвижные (или неподвижные) палочки, расположенные единично или короткими цепочками, размером 0,4—0,6 х 1,0—3,0 мкм. Они являются факультативными анаэробами, хорошо растут при t 37° на обычных питательных средах, на слабощелочном агаре образуют изолированные колонии без склонности к роению.
Providencia не ферментируют лактозу, из углеводов постоянно сбраживают только глюкозу, иногда со слабым газообразованием, утилизируют цитрат, не гидролизуют мочевину, дают отрицательную реакцию Фогеса — Проскауэра (см. Фогеса-Проскауэра реакция) и положительную реакцию с метиловым красным, не разжижают желатину, не образуют сероводорода, образуют индол, растут на среде с цианистым калием, восстанавливают нитраты в нитриты, обладают ферментом фенилаланиндезаминазой, но не имеют лизин-, орнитин-декарбоксилазы, аргининдегидролазы и цитохромоксидазы. К виду Р. alcalifaciens относят штаммы, образующие газ при ферментации глюкозы, ферментирующие адонит и не ферментирующие трегалозу; к виду P. stuartii — штаммы, не обладающие этими свойствами и ферментирующие трегалозу и инозит.
Providencia имеют О- и H-антигены; у отдельных штаммов описаны a-, ß- и К-антигены. По антигенной структуре род Р. включает 63 серологические О-группы и 30 различных Н-антигенов, сочетания к-рых образуют более 150 серологических вариантов.
Providencia описаны как возбудители групповых или спорадических острых кишечных заболеваний у детей и взрослых, при этом отдельные серологические варианты Providencia. рассматриваются как энтеропатогенные, другие же могут быть выделены и от здоровых людей. Они являются частым этиол. фактором в возникновении урологических инфекционных заболеваний. Возросло их этиол. значение и в развитии тяжелых септических осложнений у больных с ожогами и после оперативных вмешательств. Одной из причин повышения этиологического значения Providencia в развитии различных заболеваний считают распространение патогенных разновидностей микроорганизмов с высокой устойчивостью к большинству антибиотиков.
Микробиологическая диагностика заболеваний, вызываемых Providencia, основывается на выделении чистой культуры при посеве исследуемого материала на дифференциально-диагностические и элективные среды для бактерий кишечной группы и дальнейшей дифференциации ее от других представителей семейства Enterobacteriaceae по основным дифференциальнодиагностическим тестам: отсутствие гидролиза мочевины, образования сероводорода и разжижения желатины, а также продукция фенилаланиндезаминазы и утилизация цитрата. Выделенная по этим признакам культура идентифицируется диагностическими О- и Н-сыворотками до определения серологического варианта.
Библиогр.: Батуро А. П. и др. Значение условно патогенных кишечных бактерий в хирургии, Хирургия, № 12, с. 93, 1976; Холодкова Е. В. и Рагинская В. П. Бактерии рода Providencia, Журн. микр., эпид. и иммун., № 5, с. 56, 1972; Bergey’s manual of determinative bacteriology, ed. by R. E. Buchanan a. N. E. Gibbons, p. 327, Baltimore, 1975; Edwards P. R. a. Ewing W. H. Identification of enterobacteriaceae, p. 331, Minneapolis, 1972; Penner J. L. a. o. Reconstitution of the somatic (O-) antigenic scheme for Providencia and preparation of O-typing antisera, J. infect. Dis., v. 133, p. 283, 1976; Penner J. L. а. о. О serotyping of Providencia stuartii isolates collected from twelve hospitals, J. clin. Microbiol., v. 9, p. 11, 1979.
Providencia stuartii что это такое
а) Таксономия. Бактерии Providencia — самостоятельный род в семействе Enterobacteriaceae. Город Providence, где они впервые были выделены, — столица штата Род-Айленд, расположенного в северо-восточной части США. В прошлом эти бактерии относили к роду Proteus в качестве отдельного вида Р. inconstans. В настоящее время результаты изучения биохимических, антигенных свойств, данные геносистематики позволили рассматривать бактерии Providencia как самостоятельный род в семействе Enterobacteriaceae, включающий в себя также следующие виды: Providencia alcalifaciens, Р. stuartii, Р. rettgeri, Р. rustigianii, Р. heimbachae. Ультратонкий срез Р. alcalifaciens представлен на рисунке ниже.
Провиденции входят в состав транзиторной нормальной микрофлоры кишечника человека и животных, и могут присутствовать в окружающей среде в качестве сапрофитной микрофлоры. Бактерии рода Providencia могут вызывать тяжелые осложнения у больных с ожогами, после операций, явиться причиной пневмонии, бактериемии, острых гастроэнтеритов. Р. stuartii и Р. rettgeri нередко обнаруживали в моче госпитализированных больных после катетеризации мочевого пузыря. Эти виды часто оказываются причиной внутрибольничных инфекций.
б) Морфология и биохимические свойства. Провиденщш — грамотрицательные палочки; спор и капсул не образуют; как правило, подвижны; обладают способностью дезаминировать аминокислоты; не содержат декабоксилаз лизина и орнитина, не образуют сероводорода; мочевину гидролизуют только Р. rettgeri и некоторые представители Р. stuartii. Внутриродовая дифференциация возможна по признакам, представленным в таблице ниже.
Детальное изучение ферментативных свойств штаммов Providencia, выделенных из различных источников, позволило разным авторам дифференцировать исследованные штаммы на биотипы, что важно с эпидемиологической точки зрения. Так, в зависимости от способности образовывать газ из глюкозы и ферментировать адонит и инозит было определено два биотипа у Р. alcalifaciens и три у Р. stuartii. Неодинаковое отношение к салицину и рамнозе привело к выделению четырех биотипов Р. rettgeri.
Было показано, например, что штаммы Р. rettgeri, полученные от больных с хирургической, урологической патологией, дисфункцией желудочно-кишечного тракта, принадлежали главным образом к 4-му биотипу — не ферментировали ни салицин, ни рамнозу.
Ультратонкий срез Providencia alcalifaciens. Ув. х 65 000, ТЭМ
в) Факторы патогенности. Как и все энтеробактерии, провиденции обладают эндотоксином (ЛПС). Некоторые штаммы способны синтезировать фимбриальные адге-зины, различного тина энтеротоксины, разнообразные протеолитические ферменты, ДНК-азы, РНК-азы и др..
г) Лабораторная диагностика. Материалом для выделения бактерий рода Providencia может быть моча, фекалии, рвотные массы, пищевые продукты, кровь, отделяемое ран, генитального тракта и др. Исследуемый материал (кроме стерильных в норме жидкостей организма) сеют количественным методом, для чего после гомогенизации проб готовят десятикратные разведения в буферном фосфатном растворе. Бактериологическое исследование соответствует стандартной схеме.
Второй день. Просматривают чашки, засеянные накануне. Подсчитывают число выросших колоний каждого вида. Отбирают подозрительные колонии для дальнейшего изучения. На среде Эндо Providencia образуют небольшие бледно-розовые прозрачные колонии, на агаре Плоскирева — колонии прозрачные с желтоватым оттенком. Для исследования отбирают не менее 3 однородных но виду колоний или 2-3 колонии каждого вида, если на чашках обнаружен разновидный рост.
Отобранные колонии (каждую отдельно) засевают петлей в полужидкий агар, под пробку пробирки помещают полоску индикаторной бумаги на индол; агар Клиглера (не забыть проткнуть столбик среды!), цитратный агар Симмонса, среду с мочевиной (посевы производят бактериологической петлей из одной пробирки в другую в указанном порядке, не прожигая петли). Посевы инкубируют в термостате при 37°С в течение 18-24 ч.
Третий день. Учитывают результаты ферментативной активности. Культуры, не ферментирующие лактозу, не продуцирующие сероводорода, образующие индол (индол-отрицательны только Р. heimbachae), не гидролизующие мочевину (уреазой обладают только Р. rettgeri и некоторые представители Р. stuartii), утилизирующие или не утилизирующие цитрат в качестве единственного источника углерода, подозрительны на принадлежность к роду Providencia. Для подтверждения родовой принадлежности и определения вида требуется провести дополнительные тесты: в первую очередь посев на фенилаланиновый агар и другие.
Четвертый день. Учитывают полученные результаты. При положительной реакции на фенилаланиновом агаре (появление темно-зеленого окрашивания при добавлении 10%-ного водного раствора FeCl3) и по результатам дополнительных тестов определяют вид выделенных бактерий.
Как и при лабораторном исследовании других условно-патогенных энтеробактерий, при обнаружении бактерий одного вида в концентрации 10 5 и более КОЕ/мл, они могут быть заподозрены в качестве этиологического агента.
д) Лекарственная чувствительность. Провиденции обычно чувствительны к канамицину и гентамицину, устойчивы ко многим антибактериальным препаратом, в частности, к полимиксину, цефалотину, тетрациклину. Приобретенная резистентность формируется в процессе лечения и зависит от тактики выбора и назначения препаратов. Полиантибиотикоустойчивые штаммы провиденций нередко являются причиной оппортунистических инфекций у иммунокомпрометированных больных. Чувствительность к антибиотикам определяют общепринятыми методами, чаще используют диско-диффузионный метод на среде АГВ или агаре Мюллера-Хинтона.
Редактор: Искандер Милевски. Дата публикации: 6.4.2020
„„Я0„„1472493.(51) 4 C 12 N 9/14//(Ñ «,. «: 9/ 14
«С 12 R 1:01) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ABTOPCHGMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ!
Изобретение относится к микробиологической промышленности и представ-, ляет собой штамм, который может быть использован для получения рестриктазы Pst 1.
Цель изобретения — получение нового штамма, обладающего более высоким уровнем синтеза рестриктазы
Штамм Providencia stuartii (17)
ВКПИ В-4076 получен в результате многократных пересевов с отбором ваГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ
ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ
Ireen,Р.J., Heyneker H.L., Bolivar F., Rodriguez R.L., Betklach М.С., Covarrubias А.А., Back
STUARTII — ПРОДУЦЕНТ РЕСТР!!КТАЗЫ
PST 1. (57) Изобретение относится к микробиологической промышленности и представляет собой штамм, который исполь- зуется для получения рестриктазы
Предлагаемый штамм Providencia stuartii 17. ВКПМ В-4076 дает выход рестриктазы Pst 1 40000-45000 ед/г био,— массы или 300000-400000 ед/л культуральной жидкости и имеет высокую стабильность, а именно сохраняет способность продуцировать фермент при хра- а ф некии не менее 5 лет без селекционной работы. В результате использования предлагаемого изобретения выход рестриктазы Pst 1 возрастает с 400 — Сю
600 ep/г биомассы до 40000-45000 ед/г биомассы или с 3000-4800 ед/л культуральной жидкости до 300000 leek
Штамм имеет следующие характеристики.
Клетки палочковидные, как правило 0,4-0,6 х 1,0-3,0 мкм, Жгутики есть, спор не образуют. Грамотрицательные.
Физиологические признаки, При выращивании на ксилозе, арабинозе, мальтозе и рамнозе кислота
3 147249 не образуется. Тесты на метиловый красный и фенилаланиндеаминазу положительные, а орнитиндекарбоксилазу и реакцию когес-Проскауэра — отрицательные. Индол образуется, а серо5 водород не образуется.
Штамм растет на твердой питательной среде, содержащей 3,5% агара су0 хого питательного и воду, при 35-37 С в течение 16-18 ч, Рост штамма Providencia stuartii (17) ВКПМ В-4076 умеренный, штрих четковидный. Характер края колоний гладкий, блеск поверхности колоний матовый, характер поверхности — гладкий.
Профиль штриха — выпуклый. 26
По оптическим признакам колонии являются опаковыми, т.е. не просве.чивающимися.
Штамм Providencia stuartii 17 имеет специфичный запах, колонии этого 25 штамма по консистенции являются маслянистыми.
Хорошо растет на жидкой питательной среде, содержащей рыбный гидрализат 50 г/л; воду до 1,0 л, рН 7,2 — 3р
7,4. На такой питательной среде штамм растет при 35-37 С в течение
5-6 ч, При.выращивании штамма на питательной среде данного состава происходит помутнение среды, что свидетельствует о сильном росте культуры.
Рост глубинный и пленки на поверхности не образуется. Осадок, состоящий из клеток Providencia stuartil 17 40 тягуиий, при воздействии на него лизоцимом быстро происходит лизис клеток. Количество осадка обильное, цвет осадка — светло-серый.
В ОТличие От известного предлагае 45 мый штамм дает выход рестриктазы Pst
1 40000-45000 ед/г биомассы или
300000-400000 ед/л культуральной: жидкости; имеет высокую стабильность, а именно: сохраняет способность продуцировать фермент при хранении не
50 менее 5 лет без селекционной работы.
При выращивании культуры на питательной среде известного. состава рН 7,4; температуре 37 С; аэрации
40 л/мин ферментацию ведут до достижения значения рН 8,0, Выход биомассы: 7,5-8,0 r/ë культуральной жидкости. Выход рестриктазы Pst 1.:
20000-22500 ед/г биомассы; 150000—
180000 ед/л культуральной жидкости.
Сравнение стабильности содержания рестриктазы Рз1 1 при хранении представлено в таблице.
Пример 1. Для получения штамма с высоким содержанием рестрик тазы Р st 1 велась непрерыв ная селекционная работа с отбором вариантов, имеющих высокую продуктивность рестриктазы Pst 1.
Селекция велась в чашках Петри по твердой среде, содержащей 3,5% агара сухого питательного и воду, Проверка продуктивности штамма
Providencia stuartii 17 ВКПМ В-4076, полученного селекционным путем, велась в сравнении со штаммом ProvidencЫ stuartii (164) ВКПМ В-1789, который апробирован в производственных условиях.
Готовят среду следующего состава, г/л:
Рыбный гидролизат 50
Оживление штамма Providencia
stuartii ВКПМ В-4076 осуществляют на сухом питательном агаре (сухой питательный агар 35 г/л, вода 1,0 л) в чашках Петри. Инкубируют в термоо камере при 37 С в течение 18 ч.
С поверхности агара в чашках Петри культуру переносят бактериологической петлей в качалочные колбы с питательной средой данного состава, рН 7,4.
Выращивают посевной материал при
37 С в течение 18 ч на качалке.
Ферментацию культуры проводят на питательной среде данного состава при рН 7,4; температуре 37 С; перемешивании 200 об/мин; подаче воздуха — 2 объема воздуха на 1-объемl питательной среды выращивают до досСоставитель Н.Ходарев
ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Производственно-издательский комбинат «Патент», г.Ужгород, ул. Гагарина, 101
5 1472493 6 тижения оптической плотности бакте- В-4076 по сравнении с известным спо— риальной суспензии 1,5 опт. ед, (ФЭК, собом выход рестриктазы Pst 1 возфильтр N- 6, кювета 0,5 см), растает с 400-600 ед/г биомассы до
Выход биомассы: 7,5-8,0 г/л куль- 40000-45000 ед/г, туральной жидкости.
Выход рестриктазы Pst 1 40000— Формулаизобретения
45000 ед/г биомассы; 300000
Providencia stuartii | |
---|---|
Научная классификация | |
Домен: |