shewanella algae что это
Способ выделения и идентификации бактерий рода shewanella
Владельцы патента RU 2435845:
Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано при бактериологических исследованиях по выделению и идентификации бактерий Shewanella и производстве питательных сред для этих исследований. Способ предусматривает посев исследуемого материала на питательную среду, содержащую панкреатический гидролизат рыбной муки, пептон ферментативный из мяса, NaCl, твин-80, CaCl2, тиосульфат натрия (Na2S2O3×5НзO), соль Мора ((NH4)2SO4 x FeSO4×6Н2О), сорбит, бромтимоловый синий, иргазан (DP-300), рифампицин, NaOH, агар и дистиллированную воду в заданных соотношениях. Растворяют при нагревании панкреатический гидролизат рыбной муки, пептон, NaCl, агар, стерилизуют при 121°С в течение 20 мин, с последующим добавлением в горячую среду остальных указанных выше ингредиентов. Проводят инкубирование посевов на питательной среде в аэробных условиях при температуре 37°С и/или 28°С в течение 24-48 ч с последующим учетом результата по наличию колоний зеленого цвета с черным центром или темно-серых, окруженных зоной мутного преципитата в питательной среде. Изобретение позволяет упростить и повысить специфичность выделения и идентификации бактерий к роду Shewanella.
Изобретение относится к области микробиологии. Может быть использовано при бактериологических исследованиях по выделению и идентификации бактерий рода Shewanella и производстве питательных сред для этих исследований.
Известен способ выделения и идентификации бактерий рода Shewanella непосредственно из исходного материала на морском 2216 агаре (Difco Lab.) или питательном агаре (Oxoid) без предварительного обогащения. Колонии бактерий Shewanella часто опознаются по их бледной или розовой (цвета лосося) окраске (Bowman J.P. Genus XIII. Shewanella Mac Donell and Colwell 1986,355 (Effective publication: Mac Donell and Colwell 1985,180), in Bergey’s Manual of Systematic Bacteriology, 2 nd ed., Garriti G.M., Brenner D.J., Krieg N.R., and Staley J.T., Eds., New York: Springer, 2005, Vol.2, part B, pp.480-491).
Известен также способ выделения и идентификации бактерий рода Shewanella на традиционных питательных средах, включая агар МакКонки, на котором они хорошо растут, образуя через 18-24 ч инкубации желто-коричневые колонии диаметром 1-2 мм. Далее изоляты из желто-коричневых колоний идентифицируют родовыми тестами (О/Ф тест с глюкозой на отсутствие ферментации, тест на наличие оксидазы, тест на продукцию сероводорода на среде Клиглера). Затем используют тесты для идентификации видов S.putrefaciens, S. algae. Оба вида гидролизуют желатин, имеют нитратредуктазу, орнитиндекарбоксилазу; в отличие от S.putrefaciens S.algae обладает бета-гемолизом на кровяном агаре с кровью барана, растет при 42°C и в питательной среде с 6% NaCl. Автоматизированные системы идентификации не различают виды S.putrefaciens, S.algae, так как в программных интерфейсах систем 20Е, 20 NE,I D 32GN, Vitek базы данных включают только вид S.putrefaciens (Н.М.Holt, В.Gahrn-Hansen, В.Brunn Shewanella algae and Shewanella putrefaciens: clinical and microbiological characteristics. Clin. Microbiol. Infect. 2005; Vol.11, №5: p.347-352).
Прототипом заявляемого способа нами избран способ по H.Nozue, T.Hayashi et al с использованием питательной среды DHL Agar, так как в обоих способах выделение и идентификация бактерий Shewanella проводится на плотных питательных средах по признаку продуцирования сероводорода.
Недостатками прототипного способа и аналогов являются:
— недостаточная специфичность идентификации колоний бактерий Shewanella на среде первичного посева ввиду возможного наличия колоний других родов бактерий с такими же дифференцирующими признаками (присутствие на среде DHL Agar бесцветных колоний с черным центром у продуцирующих сероводород бактерий Salmonella, Citrobacter, Proteus; наличие на питательном агаре (Oxoid) колоний с розовой окраской бактерий Pseudomonas stutzeri, Alcaligenes faecalis, Roseomonas spp.; наличие на среде МакКонки желто-коричневых колоний бактерий Pseudomonas spp., Roseomonas spp.);
— сложность исследования по идентификации бактерий рода Shewanella ввиду необходимости использования дополнительных тестов для изучения изолированных колоний (определение оксидазы, ферментации и окисления углеводов О/Ф тестом, продукции сероводорода).
Целью изобретения является повышение специфичности и упрощение исследования по выделению и идентификации бактерий рода Shewanella.
Совокупность указанных отличительных существенных признаков определяет упрощение выделения и идентификации бактерий рода Shewanella, так как выявление колоний Shewanella по признаку образования сероводорода, а также по наличию липазы и отсутствию ферментации сорбита надежно обеспечивает прямую идентификацию этих бактерий на питательной среде заявляемого способа, что исключает необходимость постановки дополнительных таксономических тестов родовой идентификации.
Существенными признаками способа являются некоторые компоненты питательной среды, которые обеспечивают питательные потребности бактерий Shewanella, г/л: панкреатический гидролизат рыбной муки 12,0; пептон ферментативный из мяса 12,0; хлорид натрия 6,0; агар 12,0. Эти компоненты соответствуют составу коммерческой питательной среды «питательный агар для культивирования микроорганизмов сухой (ГРМ-агар)», что удобно для приготовления среды заявляемого способа. Выращивание посевов необходимо проводить при 37°C и/или 28°C, так как некоторые виды бактерий рода Shewanella (S.baltica) не растут при 37°C.
Примеры, подтверждающие возможность осуществления способа.
Таким образом, при всех предельных концентрациях основных компонентов питательной среды заявляемого способа (иргазана, рифампицина), вариантах температурного режима (37°C и 28°C) и времени экспозиции (24-48 ч) получены четкие результаты выявления и идентификации бактерий рода Shewanella.
Заявляемый способ выделения и идентификации бактерий рода Shewanella упрощает данное исследование, так как на питательной среде заявляемого способа достигается прямая родовая идентификация Shewanella по типу колоний без дополнительных исследований.
Способ выделения и идентификации бактерий рода Shewanella, предусматривающий посев исследуемого материала на питательную среду, содержащую источники азота, углерода, серы, углеводы, ингибиторы посторонней микрофлоры, индикаторы рН и образования сероводорода, агар и дистиллированную воду; инкубирование посевов при 37°С и/или 28°С в аэробных условиях в течение 24-48 ч; определение принадлежности выделенных бактерий к роду Shewanella по наличию колоний зеленого цвета с черным центром или темно-серых, окруженных зоной мутного преципитата в питательной среде, отличающийся тем, что питательная среда содержит в качестве ингибитора посторонней микрофлоры иргазан (0,14-0,2 г/л) и рифампицин (0,0005-0,001 г/л); тиосульфат натрия (0,35 г/л); соль Мора, сорбит, бромтимоловый синий, твин-80, хлорид кальция, хлорид натрия, гидроксид натрия при следующем содержании ингредиентов, г/л:
Shewanella algae что это
Proteus mirabilis – повсеместно встречающийся в природе, в том числе в загрязненной органическими веществами воде, условно-патогенный гнилостный микроорганизм из семейства Enterobacteriaceae. Представляет собой грамотрицательную, не образующую спор и капсул, очень подвижную полиморфную палочку, хорошо растущую на различных субстратах и обладающую сильной протеолитической активностью. В санитарной микробиологии протей считают индикатором гнилостного загрязнения объектов окружающей среды. Протей может обладать вирулентностью в отношении ослабленных животных и людей.
Shewanella putrefaciens – грамотрицательная полиморфная бактерия, обитает в пресной, солоноватой и солёной водных средах, является факультативным анаэробом. Впервые Shewanella putrefaciens была выделена из молочных продуктов Derby и Hammer в 1931 году, в тот момент ей было присвоено название Achromobacter putrefaciens. Затем её именовали Pseudomonas putrefaciens. В 1981 году она была отнесена к виду Shewanella putrefaciens. Shewanella putrefaciens оказывает значительное влияние на водную флору и фауну. У инфицированных этим микроорганизмом морских животных возникают повреждения кожных покровов в виде гнойно-некротических очагов. Могут также поражаться мягкие ткани, брюшина, кровь. Обычно морские животные заражаются в условиях экологического стресса, и тогда все внутренние органы могут быть инфицированы, что наносит большой урон морскому промыслу. В результате способности бактерии производить летучие сульфиды, амины и дурнопахнущие соединения триметиламина, объекты морского промысла, обсеменённые шеванеллой, выделяют запах гниющих водорослей, интересно также, что Shewanella putrefaciens может вызывать коррозию на стальных поверхностях морских судов. Это происходит за счёт её способности производить сульфиды и разрушать структуру железа. Биологические свойства Shewanella putrefaciens как патогена, общего для человека и животных, изучены недостаточно.
Pseudomonas rhodesiae – бактерия, обитающая в пресной, солоноватой и солёной водных средах. Pseudomonas rhodesiae – микроорганизм из семейства Pseudomonadaceae. Представляет собой аэробные, психрофильные, грамотрицательные мелкие палочки, не образующие спор и капсул, располагающиеся в мазке беспорядочно, одиночно и попарно. Pseudomonas rhodesiae проявляет замедленный и скудный рост на различных питательных средах для энтеробактерий и псевдомонад. Потенциальная вирулентность изучена недостаточно.
Объектом нашего изучения были культуры Shewanella putrefaciens, выделенные при исследовании мазка из гнойно-некротического очага на коже белухи, содержащейся в океанариуме Крыма.
Цель исследования:
1. Определение вирулентных свойств выделенных из патологического материала микроорганизмов – представителей водной среды обитания;
2. Поиск оптимальной биомодели для изучения вирулентности бактерий – возбудителей болезней животных, обитающих в воде.
Материалы и методы. Исследовали чистые культуры Proteus mirabilis, Shewanella putriphaciens и Pseudomonas rhodeziae, выделенные в виде ассоциации из гнойно-некротического очага на коже белухи. Перед изучением вирулентности делали их пересев на скошенный ГРМ-агар, культивировали в течение 24 часов при 37 градусах С, (а медленно растущую Pseudomonas rhodeziae – в течение 48 часов при 20 градусах С), производили смыв культур 0,9 %-м раствором хлорида натрия и доводили концентрацию полученной суспензии микробных клеток до 1 млрд КОЕ/мл по стандарту мутности.
Изучали влияние данных микроорганизмов при использовании следующих биомоделей:
• Взрослые белые мыши при заражении подкожно, в дозе 0,2 мл и внутрибрюшинно в дозе 0,5 мл.
• Куриные эмбрионы, возраст 7 суток, при заражении в желточный мешок, в дозе 0,2 мл.
Нами предложены для изучения водных микроорганизмов ещё две биомодели:
1. Взрослые рыбки гуппи, самки, при внесении 1 см3 взвеси смыва суточной культуры бактерий концентрацией 1 млрд КОЕ/мл на 2 л аквариумной воды.
2. Пресноводные аквариумные моллюски красные роговые катушки ( Planorbarius corneus) при внесении 1 см3 взвеси смыва суточной культуры бактерий концентрацией 1 млрд КОЕ/мл на 2 л аквариумной воды.
Наблюдение за биомоделями вели в течение 10 суток.
Результаты исследования. Установлено, что клинические изоляты Proteus mirabilis и Shewanella putrefaciens проявляют вирулентность при заражении белых мышей, куриных эмбрионов, рыбок гуппи и пресноводных аквариумных моллюсков роговых катушек ( Planorbarius corneus).
Наиболее вирулентной является культура Proteus mirabilis, вызывающая гибель 2 мышей из двух заражённых в течение 4 суток после введения материала. Эта же культура вызывает гибель куриного эмбриона при просмотре на 5-й день инкубации после заражения. При вскрытии наблюдалось интенсивное помутнение аллантоисной жидкости, разложение тканей эмбриона и неприятный запах тухлого мяса.
Шеванелла и псевдомонада родезия не вызывали гибели мышей при подкожном и внутрибрюшинном заражении.
Куриные эмбрионы при заражении шеванеллой погибали в течение недели после заражения в желточный мешок. При просмотре вскрытых куриного эмбрионов наблюдали кровоизлияния сосудов желточного мешка, серо-зелёный цвет содержимого желточного мешка, помутнение аллантоисной жидкости и неприятный резкий запах гниющих водорослей.
Однако биомодель – куриный эмбрион не является удобной при изучении вирулентных свойств микроорганизмов.
При внесении в аквариумную воду культуры Proteus mirabilis в течение 5 дней погибли обе рыбки гуппи. Перед гибелью у рыбок наблюдали кровоизлияния в сосудах хвоста и жабр. Это было хорошо видно невооружённым глазом. Вода сильно помутнела.
Все моллюски-катушки в воде, заражённой Proteus mirabilis, погибли в течение 1 суток после внесения культуры. Мы наблюдали падение моллюсков на дно аквариума, прекращение движений, расслабление мускулатуры с выпадением части тела моллюска во внешнюю среду.
При заражении воды в аквариуме культурой Shewanella в течение 5 дней погибла 1 рыбка из двух. У второй рыбки наблюдалась заторможенность, нарушение координации движений, плавание под углом к поверхности воды головой вверх. Вода в аквариуме вначале сильно помутнела, однако потом – стала прозрачной.
В аквариуме после заражения культурой шеванелл погиб один моллюск-катушка из 3 при этом. Мы наблюдали, как и в случае, описанном выше, падение моллюска на дно, прекращение движений и частичное выпадение тела моллюска во внешнюю среду.
При заражении воды в аквариуме культурой Pseudomonas rhodeziae гибели рыбок и моллюсков не наблюдалось. Вода оставалась слегка мутноватой.
Установлено, что наиболее вирулентным возбудителем гнойно-некротического процесса на коже белухи явился Proteus mirabilis. Вирулентными свойствами слабой степени обладает также Shewanella putrifaciens. Изолят Pseudomonas rhodeziae авирулентен. По результатам исследования микроорганизмов – возбудителей болезней морских млекопитающих – предлагаем в качестве биомодели для определения их вирулентности использовать недорогую и удобную биосистему: пресноводный аквариумный моллюск – красная роговая катушка (Planorbarius corneus).
Активность антибактериальных средств in vitro
Грамотрицательные неферментирующие микроорганизмы широко распространены в окружающей среде. Одной из серьезных проблем является диагностика вызванных ими инфекций, связанная с объективными трудностями их выделения и идентификации. Второй проблемой является то, что для них характерна полирезистентность к антимикробным препаратам, включая те, которые обычно активны против Pseudomonas aeruginosa.
В данном исследовании определялась антибактериальная активность in vitro различных препаратов по отношению к 177 выделенным в клинике штаммам неферментирующих бактерий (кроме Pseudomonas aeruginosa и Acinetobacter spp.). МПК определялась методом разведений в агаре. Использовали среду Мюллера-Хинтона. Оценивали активность ампициллина, пиперациллина, пиперациллин/тазобактама, сульбактама, цефоперазона, цефоперазон/сульбактама, цефтазидима, цефепима, азтреонама, имипенема, меропенема, колистина, гентамицина, амикацина, триметоприм/сульфаметоксазола, хлорамфеникола, эритромицина, рифампицина, норфлоксацина, ципрофлоксацина и миноциклина.
У 7 изолятов: Sphingobacterium multivorum(2), Sphingobacterium spiritivorum(1), Empedobacter brevis(1), Weeksella virosa(1), Bergeyella zoohelcum(1) и Oligella urethralis (1), вместо чувствительности к цефоперазону или сульбактаму определяли чувствительность к амоксициллин/клавуланату и ампициллин/сульбактаму.
Полирезистентность к антибактериальным препаратам была характерна для таких возбудителей, как Stenotrophomonas maltophilia, Burkholderia cepacia, Chryseobacterium spp., Myroides spp., Achromobacter xylosoxidans и Ochrobactrum anthropi.
В то же время, такие микроорганизмы, как Pseudomonas stutzeri, Shewanella putrefaciens-algae, Sphingomonas paucimobilis, Pseudomonas oryzihabitans, Bergeyella zoohelcum, Weeksella virosa и Oligella urethralis часто были чувствительны к большинству из тестируемых антибиотиков.
Учитывая, что различные виды возбудителей, образующих группу грамотрицательных неферментирующих микроорганизмов, демонстрируют различные показатели антибиотикорезистентности, для выбора оптимальной схемы лечения требуется проведение микробиологического исследования с идентификацией возбудителя и выявления показателей его антибиотикорезистентности. Феномен полирезистентности, характерный для ряда возбудителей, требует активной разработки новых антибактериальных средств или поиска новых комбинаций антибиотиков, обладающих синергизмом бактерицидного действия по отношению к данным микроорганизмам.
«In vitro» activity of different antimicrobial agents on Gram-negative nonfermentative bacilli, excluding Pseudomonas aeruginosa and Acinetobacter spp. (Vay C.A., Almuzara M.N., Rodriguez C.H., Pugliese M.L., Lorenzo Barba F., Mattera J.C., Famiglietti A.M. Rev. Argent Microbiol., 2005;37(1):34-45).
Код вставки на сайт
Активность антибактериальных средств in vitro
Грамотрицательные неферментирующие микроорганизмы широко распространены в окружающей среде. Одной из серьезных проблем является диагностика вызванных ими инфекций, связанная с объективными трудностями их выделения и идентификации. Второй проблемой является то, что для них характерна полирезистентность к антимикробным препаратам, включая те, которые обычно активны против Pseudomonas aeruginosa.
В данном исследовании определялась антибактериальная активность in vitro различных препаратов по отношению к 177 выделенным в клинике штаммам неферментирующих бактерий (кроме Pseudomonas aeruginosa и Acinetobacter spp.). МПК определялась методом разведений в агаре. Использовали среду Мюллера-Хинтона. Оценивали активность ампициллина, пиперациллина, пиперациллин/тазобактама, сульбактама, цефоперазона, цефоперазон/сульбактама, цефтазидима, цефепима, азтреонама, имипенема, меропенема, колистина, гентамицина, амикацина, триметоприм/сульфаметоксазола, хлорамфеникола, эритромицина, рифампицина, норфлоксацина, ципрофлоксацина и миноциклина.
У 7 изолятов: Sphingobacterium multivorum(2), Sphingobacterium spiritivorum(1), Empedobacter brevis(1), Weeksella virosa(1), Bergeyella zoohelcum(1) и Oligella urethralis (1), вместо чувствительности к цефоперазону или сульбактаму определяли чувствительность к амоксициллин/клавуланату и ампициллин/сульбактаму.
Полирезистентность к антибактериальным препаратам была характерна для таких возбудителей, как Stenotrophomonas maltophilia, Burkholderia cepacia, Chryseobacterium spp., Myroides spp., Achromobacter xylosoxidans и Ochrobactrum anthropi.
В то же время, такие микроорганизмы, как Pseudomonas stutzeri, Shewanella putrefaciens-algae, Sphingomonas paucimobilis, Pseudomonas oryzihabitans, Bergeyella zoohelcum, Weeksella virosa и Oligella urethralis часто были чувствительны к большинству из тестируемых антибиотиков.
Учитывая, что различные виды возбудителей, образующих группу грамотрицательных неферментирующих микроорганизмов, демонстрируют различные показатели антибиотикорезистентности, для выбора оптимальной схемы лечения требуется проведение микробиологического исследования с идентификацией возбудителя и выявления показателей его антибиотикорезистентности. Феномен полирезистентности, характерный для ряда возбудителей, требует активной разработки новых антибактериальных средств или поиска новых комбинаций антибиотиков, обладающих синергизмом бактерицидного действия по отношению к данным микроорганизмам.
Зависимость электроактивности бактерий рода Shewanella от рН среды культивирования
Работа призёра открытой городской научно-практической конференции «Старт в медицину» в секции «Биофизика»
Цель
Исследование зависимости электроактивности бактерий рода Shewanella от рН-среды культивирования.
Описание
В наше время всё большую актуальность приобретают вопросы поиска альтернативных источников энергии и утилизации отходов производства и органических соединений. Одним из источников альтернативной энергетики могут стать бактерии рода Shewanella. Этот стойкий микроорганизм, открытый всего 15 лет назад, способен выжить даже в неимоверно грязных сточных водах, разлагая растворённые в них токсичные соединения металлов, при этом в качестве одного из «побочных продуктов жизнедеятельности» выделяется электричество.
Они примечательны тем, что способны давать ток, поедая и убирая долго разлагающиеся органические соединения, и не только. Бактерии Shewanella способны очищать водоёмы от соединений урана и хрома, а также защищать металлы от коррозии.
Однако бактерии эти очень прихотливы и не в каждой среде культивирования будут проявлять одинаковую электроактивность. Именно поэтому необходимо выяснить зависимость электроактивности бактерий Shewanella от pH-среды культивирования.
Гипотеза: так как пониженная рН-среда увеличивает проводимость, а для бактерий рода Shewanella есть оптимальное условие по рН, то необходимо найти такие условия, при которых эти бактерии будут полноценно развиваться, и при этом будет хорошая проводимость (условия, при которых КПД топливного элемента будет максимальным).
Задачи:
1. Культивировать бактерии рода Shewanella.
2. Создать среды жизни с различным рН с помощью молочной кислоты.
3. Создать микробные топливные элементы с разным значением рН и поставить с ними серию экспериментов по определению силы тока и разности потенциалов.
4. Подобрать оптимальные условия электроактивности бактерий.
В первой части работы автор изучил перспективы использования бактерии рода Shewanella в очистке сточных вод и в качестве антикоррозионных покрытий, а также возможности их использования в качестве источника альтернативной энергии; изучил принципы работы микробиологических топливных элементов (МТЭЛов). Во второй части работы автор поставил серию экспериментов по культивированию бактерий рода Shewanella в условиях школьной лаборатории и исследованию зависимости их электроактивности от рН-среды культивирования.
Для приготовления 200 мл среды LB (Lysogeny broth) в колбу было добавлено: NaCl – 2 г, триптон – 2 г, дрожжевой экстракт – 1 г. Объём доведён дистиллятом до 200 мл. Среда LB имеет рН в диапазоне от 7,2 до 7,4. Для проведения измерений при необходимых рН среда разбавлялась 40-процентным раствором молочной кислоты. В колбе со средой располагали датчик рН. Затем по каплям добавлялся раствор молочной кислоты. Таким образом, были получены среды с показателями рН, равными 5,0, 6,0 и 7,0. Колбы со средой укупоривались ватно-марлевыми пробками и автоклавировались при избыточном давлении (0,8 атм) на протяжении 40 минут. В опытах использовался МТЭЛ (микробиологический топливный элемент). Бактерии располагаются в анаэробной анодной камере, закрытой гидрозатвором. Катодная камера аэробна и заткнута ватно-марлевой пробкой, пропускающей воздух. К каждой камере подходят электроды, выходящие контактами наружу. Сами камеры отделены друг от друга ионоселективной мембраной, пропускающей протоны водорода по градиенту концентрации. МТЭЛ с заселёнными бактериями сутки инкубировался при комнатной температуре. В процессе своего развития Shewanella первоначально использует кислород для дыхания. После того как кислород в камере заканчивался, бактерии переходили в анаэробную стадию, демонстрируя электрогенные свойства. Спустя сутки проводились измерения потенциала, генерируемого МТЭЛ, с помощью потенциостата в течение 240 c. «плюс» прибора подключался к катодной камере, «минус» – к анодной. Прибор фиксировал разность потенциалов. На основе данных построен график.
Оснащение и оборудование, использованное в работе
Результаты
1. При измерении разности потенциалов, генерируемой микробиологическим топливным элементом среды с показателем pН 7,0, потенциал быстро стабилизируется на низких значениях.
2. Среда с показателем pН 6,0 при аналогичных измерениях демонстрирует лучшие результаты (13600 mВ).
3. При сильном понижении pН среды (до 5,0) наблюдается снижение жизнеспособности бактерий.
4. Из исследованных значений кислотности среды оптимальным в плане биотехнологического использования является рН 6.
Перспективы использования результатов работы
Необходимо продолжать исследовать зависимость электроактивности бактерий от pН с меньшим шагом её изменения, чтобы найти наиболее оптимальный показатель pН для этих бактерий, а в промышленных масштабах − совершенствовать конструкцию МЭТЛов, поскольку их можно было бы применять не только в качестве альтернативного источника энергии и очистки промышленных вод, но и в медицине − в кардиостимуляторах и других приборах с низким током.
Сотрудничество с вузом при создании работы
Московский физико-технический институт (МФТИ).
Награды/достижения
Особое мнение
«Было очень интересно работать с представителями вуза, использовать возможности как школьной лаборатории, так и лаборатории МФТИ, делать научную работу, хотя и небольшую. Очень надеюсь продолжить заниматься наукой в дальнейшем. Проект «Медицинский класс в московской школе» дает больше возможностей поступления в медвузы: углублённая предметная подготовка, интересные мероприятия, практика в медучреждениях района, предпрофессиональный экзамен и др. На конференции каждый год представлено много интересных работ. Был хороший опыт представления своей работы и отстаивания своих позиций, а также было очень познавательно посетить мастер-классы и музей Сеченовского университета»